CAR-T治疗从未止步

正在进行“战斗”的CAR-T细胞

由于CAR-T能够定向治疗疾病，又被称作给患者“活的药”。目前CAR-T治疗只是用于少量临床实验和晚期血癌的患者治疗。由于其它的治疗方案都已经没有办法时，CAR-T的显著效果这都引起研发人员和公众的关注，这些患者中包括成人和孩子。2017年，CAR-T治疗被美国FDA批准应用于孩子急性淋巴细胞白血病和成人晚期细胞癌。由于T细胞采取患者本身体内，不会产生免疫系统的抗性，因此帮忙患者进行治疗疾病。

CAR-T治疗流程

标准的CAR-T治疗流程主要分为以下七个步骤进行（整个疗程持续5周左右）：

1.评估病人是否符合CAR-T治疗的适应症

2.分离T细胞：通过外周血血细胞分离机从肿瘤病人血液中分离出单个核细胞，进一步纯化T细胞。

3.改造T细胞：用基因工程技术，把一个含有能识别肿瘤细胞且激活T细胞的嵌合抗原受体的病毒载体转入T细胞，即把T细胞改造成CAR-T细胞。

4.扩增CAR-T细胞：在体外培养以大量扩增CAR-T细胞。一般一个病人需要几千万，乃至几亿个CAR-T细胞，体重越大，需要细胞越多。

5.CAR-T细胞回输入人体：把扩增好的CAR-T细胞通过静脉回输到病人体内，开始进行肿瘤细胞免疫治疗。

6.监控反应：严密监护病人身体反应，尤其是细胞输入体内后一至两周内可能发生剧烈不良反应。

7.评估治疗效果：多在回输CAR-T细胞后第15天和第30天评估对原发病的治疗效果。

目前研究学者正在为其他类型的CAR-T治疗，即通用型CAR-T细胞。在采集过程中，T细胞不是来自患者，而是取自已经治愈的患者体内。这样就不用针对每个病例，而单独进行培养各自的CAR-T细胞。通用型CAR-T疗法则可以对异体T细胞进行提前制备，随时提供给患者。此外，它也不受患者自身T细胞质量的影响。但它还是一个新兴领域，人们对CAR-T细胞治疗的科学认识尚有许多需要解决的问题。

相关操作

1、血液中的白细胞有五种,按照体积从小到大是:淋巴细胞,嗜碱性粒细胞,嗜中性粒细胞,嗜酸性粒细胞和单核细胞。然后采用连续或者半连续的密度梯度离心的方法，再经过磁珠法进行细胞富集。

程序控制离心机

2、通过分子生物学操作，让质粒携带CAR基因，大量扩增质粒的目的是扩增CAR基因，用于转导使用。其中质粒是细菌、放线菌等生物中染色体（或拟核）以外的DNA分子，存在于细胞质中（但酵母除外，酵母的2 μm质粒存在于细胞核中），具有自主复制能力，使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数，并表达所携带的遗传信息，是闭合环状的双链DNA分子。

恒温振荡培养箱

3.用贴壁细胞和悬浮细胞培养，通过病毒转染细胞的方法生产目的病毒。

滚瓶培养用于贴壁细胞培养

培养箱用于悬浮细胞培养