离心机在血型选取上的应用

输血时如血型不合会造成患者出现输血的不良反应，因此使用相符的血型是输血安全的前提保证。而作为人类的重要遗传标志-血型，在近年科学的发展下，人们逐步探索分析，已发现300余种现人类红细胞血型抗原。当今，世界多国正努力建立稀有血型细胞血库，当中对所发现的稀有血型，如Rh、MNSs、P、Kell、Kidd、Lutheran等，建立起稀有血型系统，以保证为稀有血型的患者更加快速及时地提供合适红细胞。

中国稀有血型筛选与建库

在我们的临床研究中，对于稀有血型的筛选工作和具体项目中，对于引发临床不良输血反应的稀有血型抗原或是表型组合是zui值得关注的，而事实证明这些稀有抗原或是表型组合往往存在于如Vel、Lan、Jk（a-b-）、Lu（a-b-）、Rhnull、OH等这些高频率血型抗原组以及多个血型系统中，与此同时我们也对如Fy（a-b+）、Di（a+b-）等能引起输血反应和新生儿溶血病的血型抗原的中国人*的免疫反应而进行的筛选，并希望建立起符合我国国情的稀有血型库。以此来解决我国临床上的稀有血型不足、不良输血反应的发生等问题来提高我国的输血疗效。
 

尿素溶血试验

Jk（a-b-）表型的筛选：因稀有血型本身所具有特殊性，充分利用其特点设计出将其筛选出的方法，Kidd血型系统中Jk（a-b-），此种红细胞可在2M的尿素溶液中使其红细胞膜在6h以上的时间内保持完整性。而Jka和Jkb抗原的红细胞在2M尿素溶液中*溶血的时间不超过30s。其操作过程为：选取RSP加样器设备将标本红细胞稀释到1%的悬液中，并在96孔微量板上加20ul悬液，再将100ul2mol/L尿素溶液加入其中，放置离心机中以800r/min转速离心3min，溶血为阳性，不溶血为阴性，如为阴性者则进一步对血细胞做分子生物学分析。本次通过Jk（a-b-）尿素筛选实验，获得8名Jk（a-b-）表型献血者。

试管法

将选取标本红细胞稀释为2-5%悬液，标记试管（抗-Mur、-Lub、-Rhmull、-Kell、-MN、-H）并加入相应抗血清和标本红细胞各50ul。采用直接离心法或间接抗球蛋白法，轻摇观察结果；发生凝集为阳性，反之为阴性，共发现稀·临床研究·有血型7例。

在我们对稀有血型筛选过程中，有4种稀有血型是采用筛选稀有等位基因的方法。通过采用PCR的定点诱变技术，我们成功构建出含有突变SNP位点的s和Oka血型等位基因的标准质粒，制备出稀有血型等位基因突变点片段，应用在对照分子生物学方法筛选稀有血型。组建多个多重PCR体系，检测等位基因。